我公司所銷售的大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒。品種多,質(zhì)量好,靈敏度高,涉及的品牌有美國原裝/分裝等不同價格檔次的盒子。
ELISA技術(shù)的-操作要點 原裝進口RD試劑,國內(nèi)分裝配置***.gbdelisa.* ***.spectrumchem.*
***.elisa668.* ***.shjmsj.* ***.jinmabio.* ***.shjmkit.* ***.shjmsw.* ***.jmbiosh.*
優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點.本文將敘述板式注意要點,要詳細(xì)的使用說明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果.
1 標(biāo)本的采取和保存
可用作 ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清),分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,糞便)等。均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原 成份.有些標(biāo)本可直接進行測定(如血清,尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物).大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本 .血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清.制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固,血塊收縮后即可取得.除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標(biāo)本.在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用.血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色.血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測.如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng).如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深.一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存.凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩.混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測.反復(fù)凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存.保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑.
大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒使用注意事項:
1. Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔OD值的),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.嚴(yán)格按說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
6.本試劑不同批號組分不得混用。
7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.底物請避光保存。
“大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒”注意事項:試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用;底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
備注:只限參考,具體操作需按說明書。請來電咨詢。