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PIPES中文名是哌嗪 N,N'二(2乙磺酸),它與HEPES緩沖液屬于同一家族,也是哌嗪緩沖液家族的一員,為兩性離子緩沖液,PIPES的有效PH值范圍為6.1至7.5內(nèi),不會(huì)與金屬絡(luò)合,所以常用于含金屬離子的溶液,也可使用于磷酸纖維素色譜純化微管蛋白,用于凝膠過濾法純化重組GTP結(jié)合蛋白ARF1和ARF2,作為緩沖液從大腸桿菌中結(jié)晶轉(zhuǎn)酮酶以及代替草甘膦緩沖液。另外,由于PIPES能形成自由基,因此不適合應(yīng)用于氧化還原體系。在陽離子交換色譜法,應(yīng)當(dāng)使用低濃度的PIPES緩沖液,這是因?yàn)?/span>PIPES具有相對(duì)較大的離子強(qiáng)度,而且其pKa值具有濃度依賴性。
PIPES的制備方法:如要制備1升的PIPES緩沖溶液,那么要將302克的PIPES粉末添加到600ml的去離子水中,使用10N氫氧化鈉調(diào)節(jié)至所需的PH值。
PIPES緩沖液注意事項(xiàng):
在配置實(shí)驗(yàn)所用溶液時(shí),要用去離子純水配置,容器使用前需清洗3次以上,特殊要求的溶液要先做空白值檢測(cè);
配置好的PIPES溶液要密封保存,裝在深棕色的容器中可以防止它分解;
皮膚不能直接接觸溶液,避免有毒物質(zhì)對(duì)皮膚造成傷害;
避免溫度劇烈變化造成溶液變質(zhì),建議4℃保存,避免使用時(shí)產(chǎn)生分析結(jié)果誤差。
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